Formation of biofilms by representatives of the oral microflora on the surfaces of basic materials

Abstract

Цель работы – провести сравнительный анализ формирования биоплёнок представителями оральной микрофлоры на поверхностях базисных материалов. Материалы и методы. Процесс биоплёнкобразования исследовали на образцах 7 видов пластмасс: Полиан, Брефлекс, Нейлон, Протакрил, Винакрил, Биокрил, которые используют для изготовления базисов съёмных конструкций зубных протезов, а также пластмассе СИНМА, которая использована для сравнения. Биоплёнкообразование изучали методом Y. Zhand (2017) с незначительными модификациями. Для моделирования биоплёночного роста микроорганизмов исследуемый образец помещали в пробирку с 2,0 мл питательного бульона Brain Heart Infusion Broth (HiMedia Laboratories Pvt. Ltd., Индия) с добавлением 1 % глюкозы, предварительно свежезасеянного тест-штаммами в конечной концентрации 1 × 10⁴ КОЕ/мл. Посевы культивировали в течение 24 часов при температуре 37 °С при постоянном перемешивании на шейкере MR-1 (SIA BIOS AN, Латвия), частота перемешивания – 20 раз/мин. Массивность биоплёнок оценивали после окраски генцианвиолеттом с последующей элюцией красителя этанолом. Оптическую плотность (OD) элюента регистрировали с помощью многорежимного фотометра для микропланшета Synergy™ HTX S1LFTA (BioTek Instruments, Inc., USA) при длине волны 595 нм с помощью программного обеспечения Gen5™ Data Analysis Software. Число жизнеспособных бактериальных клеток в образованных биоплёнках определяли методом десятикратных серийных разведений. Обработка результатов выполнена с помощью двухвыборочного t-теста с использованием пакета программ Statistica 13.0 и Microsoft Office Excel, при р < 0,05 различия считали статистически достоверными. Результаты представлены как среднее значение ± стандартное отклонение для трёх независимых экспериментов. Результаты. Согласно результатам микробиологических исследований, α-гемолитические стрептококки S. oralis и S. sanguinis показали способность к образованию биоплёнок на поверхностях базисных материалов, а именно Протакрил и Винакрил, интенсивность биоплёнкообразования S. sanguinis на 47,7 % (р < 0,001) и 14,7 % (р < 0,05) выше, чем у стекла. На поверхностях базисных материалов Нейлон и Биокрил отмечено торможение процессов образования биоплёнок. Наивысшую способность к выживанию в составе биоплёнок проявили S. oralis и S. gordonii. Интенсивность образования биоплёнок C. albicans на базисных материалах Биокрил, пластмассе сравнения СИНМА и Брефлекс была больше, чем на стекле на 48,3 %, 43,0 % и 34,9 % (р < 0,01). Наименее массивные биоплёнки C. albicans формировались на поверхности Брефлекс и пластмассе сравнения СИНМА по сравнению со стеклом (на 33,6 % и 24,8 %, р < 0,01). Наивысшим уровнем жизнеспособности грибов в биоплёнках обладали оба штамма Candida на базисных материалах Брефлекс, Полиан и Протакрил (р < 0,01), а биоплёнки C. tropicalis на базисных материалах Биокрил и Винакрил (р < 0,05). Интегральные коэффициенты показали снижение жизнедеятельности микроорганизмов в образованных биоплёнках. Выводы. Оральные α-гемолитические и β-гемолитические стрептококки обладают способностью к интенсивному биоплёнкообразованию на поверхностях базисных материалов Протакрил и Винакрил. Оральные Candida albicans образуют массивные биоплёнки на поверхностях базисных материалов Биокрил, Винакрил и пластмассе сравнения СИНМА. Наиболее инертные к...