Effects of orientin, gentiopicroside and oleanolic acid isolated from gentiana algida pall. on the immune system status in experiments

Abstract

Цель исследования - определение иммуномодулирующих свойств ориентина, гентиопикрозида и олеаноловой кислоты, выделенных из надземной части горечавки холодной ( Gentiana algida Pall.) при азатиоприновой иммуносупрессии. Методика. Опыты проведены на 100 мышах-самцах линии F1 (СВАхС57Вl/6) массой 18-20 г. Иммунодефицит моделировали пероральным введением азатиоприна в дозе 50 мг/кг ежедневно в течение 5 сут. (контроль). Опытные группы животных на фоне азатиоприновой иммуносупрессии получали ориентин (15 мг/кг), гентиопикрозид (12 мг/кг) и олеаноловую (4 мг/кг) 1 раз в сут. внутрижелудочно в течение 14 сут. Интактная группа мышей получала очищенную воду по схеме. Действие испытуемых соединений на состояние клеточного звена иммунного ответа оценивали в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) согласно стандартной методике локальной ГЗТ. Состояние гуморального иммунитета оценивали по количеству антителообразующих клеток (АОК), определяемых методом локального гемолиза по A.J. Cunningham (1965). Статистическую обработку результатов проводили стандартными методами вариационной статистики с использованием параметрического t -критерия Cтьюдента. Результаты. Установлено, что испытуемые биологически активные вещества: ориентин, гентиопикрозид, олеаноловая кислота, способны снижать супрессивное действие цитостатика азатиоприна на клеточно-опосредованную иммунную реакцию и антителогенез, что проявляется в повышении индекса реакции гиперчувствительности замедленного типа в 1,3-1,7 раза, абсолютного и относительного числа антителообразующих клеток в 1,6-1,8 раза по сравнению с контролем. Установлено, что наиболее выраженным иммуномодулирующим действием обладают ориентин и олеаноловая кислота. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют, что ориентин, гентиопикрозид и олеаноловая кислота, выделенные из надземной части горечавки холодной Gentiana algida, обладают иммуномодулирующим действием в отношении клеточного и гуморального звеньев иммунного ответа при экспериментальной азатиоприновой иммуносупрессии, что обосновывает целесообразность их дальнейшего исследования с целью создания новых эффективных иммуномодуляторов. The study objective was to evaluate the immune modulating effects of orientin, gentiopicroside, and oleanolic acid isolated from the aerial part of Gentiana algida Pall. on cellular and humoral immune responses in azathioprine immunosuppression. Methods. Experiments were carried out on CBA male mice (n = 100; 18-20 g). Immune deficiency was modeled by intragastrical administration of azathioprine 50 mg/kg once a day for 5 days. Experimental groups consisted of animals receiving orientin, gentiopicroside, and oleanolic acid (15, 12, and 4 mg/kg, respectively, once a day, intragastrically, for 14 days) against the background of azathioprine immunosupression. The intact group received purified water on the same schedule. Effects of the tested compounds on the cellular immunity status were evaluated in the reaction of delayed-type hypersensitivity (DTH) according to a standard method for local DTH. The humoral immunity status was evaluated by the number of antibody-forming cells determined by the method of local hemolysis by A.J. Cunningham (1965). Statistical analysis was performed using standard methods of variation statistics with a parametric Student’s t- test. Results. The studied biologically active substances, orientin 15 mg/kg, gentiopicroside 12 mg/kg, and oleanolic acid 4 mg/kg, reduced the suppressive action of azathioprine on cell-mediated immune and antibody responses; the index of delayed type hypersensitivity reaction was 1.3 to 1.7 times increased; and both absolute and relative numbers of antibody-forming cells were 1.6 to 1.8 times increased as compared with the control group. Therefore, orientin and oleanolic acid rendered most pronounced immunomodulating effects. Conclusion. These results showed that orientin, gentiopicroside and oleanolic acid isolated from the aerial part of Gentiana algida displayed a marked immune modulating activity, which justifies their further study to create new, effective immune modulators.