Comparison of inoculation methods for characterizing relative aggressiveness of two soybean sudden-death syndrome pathogens, Fusarium virguliforme and F. tucumaniae

Abstract
Fusarium tucumaniae and F. virguliforme are the primary etiological agents of sudden-death syndrome (SDS) of soybean in Argentina and the United States, respectively. Five isolates of F. tucumaniae and four isolates of F. virguliforme were tested for relative aggressiveness to soybean, using a toothpick inoculation method and two versions of a soil infestation inoculation method. Partially resistant soybean cultivar RA629 and susceptible cultivar A6445RG were inoculated separately with each of the nine isolates. Two experiments for each inoculation method were performed. Analysis of variance identified a significant three-way interaction of soybean cultivar*experiment*SDS pathogen (P = 0.01) using the different methods. When the two soil infestation methods were used, F. virguliforme was more aggressive than F. tucumaniae; however, when using the toothpick method, isolates of F. virguliforme and F. tucumaniae were equally aggressive. Although all three methods discriminated levels of partial resistance of the genotypes to SDS, results of the present study indicated that soil inoculations with sorghum infested grain represent the best method for evaluating soybean cultivar resistance to SDS. The existence of interactions among the host, pathogen and environmental conditions highlights the need for additional studies to improve the reproducibility of tests for screening soybean germplasm for resistance to SDS. Fusarium tucumaniae e F. virguliforme são agentes etiológicos primários da síndrome da morte súbita (sudden death syndrome - SDS) de soja na Argentina e nos Estados Unidos, respectivamente. Cinco isolados de F. tucumaniae e quatro isolados de F. virguliforme foram testados para agressividade relativa à soja, usando-se o método de ponta de palito de dente e duas versões do método de inoculação com solo infestado. A cultivar de soja parcialmente resistente RA629 e a cultivar suscetível A6445RG foram inoculadas separadamente com cada um dos nove isolados. Dois experimentos para cada método de inoculação foram realizados. A análise da variância identificou uma interação tripla significativa entre cultivar*experimento*patógeno SDS (P = 0,01), usando-se os três métodos. Quando os métodos de infestação de solo foram utilizados, F. virguliforme foi mais agressivo que F. tucumaniae. Entretanto, quando foi usado o método do palito de dente, isolados de F. virguliforme e F. tucumaniae foram igualmente agressivos. Embora os três métodos testados tenham discriminado níveis de resistência parcial dos genótipos à SDS, resultados do presente estudo indicam que inoculações no solo com grãos de sorgo infestados representam o melhor método para avaliação de resistência de cultivares de soja à SDS. A existência de interações entre o hospedeiro, patógeno e condições de ambiente destaca a necessidade de estudos adicionais para melhorar a reprodutibilidade de testes de seleção de germoplasmas de soja para resistência à SDS