Hepatitis B virus genotypes in patients with hepatitis D, determined by the panel of own development monoclonal antibodies

Abstract

ВВЕДЕНИЕ Прямое определение генотипа вируса гепатита B (ВГВ) в образцах крови пациентов с гепатитом дельта может быть невозможно из-за недетектируемой концентрации ДНК ВГВ. Однако наличие достаточного количества поверхностного белка ВГВ (HBsAg) в них позволяет генотипировать ВГВ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) этого антигена, используя панель моноклональных антител (МАТ). ЦЕЛЬ РАБОТЫ Сопоставление результатов генотипирования ВГВ с помощью панели МАТ собственной разработки с результатами молекулярно-биологических исследований образцов пациентов с хроническим гепатитом B (ХГВ) и определение генотипов ВГВ в образцах сыворотки крови пациентов с гепатитом дельта. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ Собраны 122 сыворотки крови пациентов с диагнозом ХГВ из Якутии и 211 сывороток крови от пациентов с гепатитом дельта из Якутии (12 образцов) и Тывы (199 образцов). Серотипы/генотипы ВГВ определяли методом ИФА с помощью разработанных реагентов. Молекулярно-биологические методы включали выделение ДНК ВГВ, амплификацию участка S-гена (713 нт), филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей. РЕЗУЛЬТАТЫ С помощью набора МАТ в образцах пациентов ХГВ с детектируемой ДНК ВГВ (86 образцов) получено 95% (82/86) валидных результатов. Выявлены следующие генотипы: A — 32 (39%), C — 3 (4%), D — 47(57%). Для 81/82 (99%) образцов результаты определения генотипа ВГВ двумя методами совпали. В образцах пациентов с гепатитом дельта получено 96,2% валидных результатов при определении генотипа ВГВ с помощью МАТ (203/211) по сравнению с 3,8% стандартным молекулярно-биологическим методом (p<0,001). Установлены следующие генотипы ВГВ: A — 17 (8,4%) образцов и D — 186 (91,6%). ВЫВОДЫ Разработанный тест с панелью МАТ позволяет достоверно определять генотип ВГВ и имеет преимущества по сравнению со стандартными молекулярно-биологическими методами при генотипировании ВГВ у пациентов с гепатитом дельта.