Улучшение кислотно-щелочного состава среды для длительного и обратимого криосохранения срезов мозга крыс

Abstract

Ранее было обнаружено, что активность глутаматергических ионотропных N-метил-D-аспартатных рецепторов (NMDAR) после длительного криосохранения срезов мозга при температуре –10°С снижалась или блокировалась. Срезы обонятельной коры крыс использовали для изучения механизмов криоповреждения NMDAR. Для восстановления активности NMDAR после криосохранения исследовали эффекты изменения внеклеточного pH замораживающей среды при регистрации NMDA-потенциалов, вызываемых электрической стимуляцией латерального обонятельного тракта. Обнаружено, что после криосохранения замораживающая среда закислялась до pH 6.5, при этом амплитуда NMDA-потенциалов снижалась по сравнению с амплитудами до криосохранения. Для сохранения активности NMDAR после криосохранения была усилена буферная емкость замораживающего раствора применением гибридной буферной системы, включающей карбонатный буфер (NaHCO₃), фосфатный (KH₂PO₄) и трис(гидроксиметил)аминометан ((HOCH₂)₃CNH₂); солевой состав при использовании такой буферной системы не менялся...