Mature rat hepatocyte dedifferentiation into long lived proliferating hepatic progenitor cells
Open Access
- 16 September 2021
- journal article
- research article
- Published by V.I. Shimakov Federal Research Center of Transplantology and Artificial Organs in Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs
- Vol. 23 (3), 148-161-161
- https://doi.org/10.15825/1995-1191-2021-3-148-161
Abstract
Цель: получить длительно пролиферирующие клетки, обладающие признаками прогениторных, за счет дедифференцировки зрелых крысиных гепатоцитов с помощью комбинаций малых молекул. Материалы и методы. Гепатоциты, выделенные из крысиной печени путем перфузии, культивировали в присутствии набора из трех малых молекул: агониста Wnt сигнального пути (CHIR99021), ингибиторов TGF-β (A83-01) и ROCK киназы (Y27632). С помощью флуоресцентной и фазово-контрастной микроскопии в процессе культивирования клеток оценивали морфологические характеристики и особенности роста культуры. Пролиферативную активность клеток анализировали с помощью цейтраферной съемки в режиме реального времени. Экспрессию поверхностных и внутриклеточных маркеров анализировали, используя проточную цитофлуориметрию и флуоресцентную микроскопию высокого разрешения. Результаты. Используя комплекс малых молекул Y-27632, A-83-01 и CHIR99021, из зрелых крысиных гепатоцитов были получены длительно пролиферирующие клетки, которые экспрессировали маркеры прогениторных клеток, такие как α-фетопротеин и HNF4α. Клетки имели гепатоцитоподобную морфологию и формировали дискретные кластеры пролиферирующих клеток, образующих в процессе культивирования единый клеточный пласт. Удаление из среды малых молекул приводило к экспансии фибробластоподобных клеток и к элиминации потенциально прогениторных гепатоцитоподобных клеток. Заключение. Подтверждена возможность получения пролиферирующих прогениторных клеток с помощью дедифференцировки зрелых гепатоцитов.Keywords
This publication has 33 references indexed in Scilit:
- Hyaluronan-Supplemented Buffers Preserve Adhesion Mechanisms Facilitating Cryopreservation of Human Hepatic Stem/Progenitor CellsCell Transplantation, 2012
- Cytokeratins of the Liver and Intestine Epithelial Cells During Development and DiseasePublished by IntechOpen ,2012
- Hepatic progenitor cells in human fetal liver express the oval cell marker Thy-1American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology, 2006
- Differential expression of HNF4α isoforms in liver stem cells and hepatocytesJournal of Cellular Biochemistry, 2006
- Role of hepatocyte nuclear factor 4α in control of blood coagulation factor gene expressionJournal of Molecular Medicine, 2005
- Liver regeneration and repair: Hepatocytes, progenitor cells, and stem cellsJournal of Hepatology, 2004
- Hepatocyte Nuclear Factor 4α Is a Central Regulator of Bile Acid ConjugationOnline Journal of Public Health Informatics, 2004
- Hepatocyte Nuclear Factor 4α (Nuclear Receptor 2A1) Is Essential for Maintenance of Hepatic Gene Expression and Lipid HomeostasisMolecular and Cellular Biology, 2001
- The cell cycle associated change of the Ki‐67 reactive nuclear antigen expressionJournal of Cellular Physiology, 1987
- HIGH-YIELD PREPARATION OF ISOLATED RAT LIVER PARENCHYMAL CELLSThe Journal of cell biology, 1969