Natural silk fiber microcarriers for cell culture

Abstract

Разработка эффективных и универсальных микроносителей является актуальной задачей тканевой инженерии и регенеративной медицины. Цель данной работы – создание биосовместимых микрочастиц в виде волокон из коконов тутового шелкопряда Bombyx mori, изучение их структуры и биологических свойств. Материалы и методы. Для получения микрочастиц отмытые от серицина коконы тутового шелкопряда Bombyx mori подвергали криоизмельчению в жидком азоте. Анализ структуры полученных микрочастиц осуществляли методом сканирующей электронной микроскопии. Оценку цитотоксичности полученных волокон проводили методом МТТ с использованием культуры клеток мышиных фибробластов 3Т3. Анализ адгезии клеток проводили с использованием линии клеток гепатокарциномы человека Hep-G2, визуализацию клеток осуществляли путем окрашивания ядер флуоресцентным красителем DAPI.Результаты. Были получены микрочастицы из натурального шелка в виде цилиндрических волокон со средней длиной 200–400 мкм и диаметром 15 мкм. Показано, что поверхность полученных микрочастиц имеет шероховатый рельеф, пор обнаружено не было. Микрочастицы являются не токсичными для клеток мышиных фибробластов 3Т3, поддерживают высокий уровень адгезии клеток гепатокарциномы человека Hep-G2. Заключение. Разработанная нами методика получения биосовместимых микрочастиц из фиброина шелка в виде волокон без использования токсичных реагентов и значительных временных затрат является перспективной для культивирования клеток и доставки клеток в область повреждения для восстановления тканей и органов.